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边境病媒生物监测:鼠类监测及鼠疫实验室检测

/ 迪达尔·合特别克 蒋晓玲 齐欣煜

鼠疫是以鼠疫耶尔森菌借鼠蚤传播为主的烈性传染病,系广泛流行于啮齿类动物间的一种自然疫源性疾病,能引起人间流行,临床主要表现为高热、淋巴结肿痛、出血倾向、肺部炎症等。鼠疫是《中华人民共和国传染病防治法》规定的甲类传染病,是《中华人民共和国国境卫生检疫法》规定的检疫传染病,它既可以通过染疫动物传染,也可通过接触病人传播。医学上将鼠疫分为腺鼠疫、败血型鼠疫、肺鼠疫等不同类型,其中以肺鼠疫对人类的危害最大,肺鼠疫患者可以成为传染源,造成人类鼠疫流行。其他型鼠疫患者随病情的发展可转化为肺鼠疫,其传染性强、传播速度快、病死率高。

鼠类监测

根据国境口岸区域病媒生物监测规定,鼠疫监测范围为国境口岸及周边400米环境范围,其监测对象为与传染病传播密切相关的鼠类及体表寄生虫()、蚊类、游离类等病媒生物。

捕获方法

鼠夹法:使用标准2号夹或弓形夹,连续布放鼠夹3天,记录捕获鼠的数量,并送实验室鉴定。每次监测有效夹数不少于300夹,诱饵以各口岸的实际情况确定。鼠密度=(捕鼠总数/有效夹数)×100%

鼠笼法:布放方法及要求与鼠夹法相同。鼠密度=(捕鼠总数/有效笼数)×100%

鼠体表寄生虫

与鼠类调查同时进行。将捕获鼠及器械放入白布袋,扎紧袋口,置于密闭容器内,用氯仿或乙醚麻醉处理。处理后的鼠体放置在白瓷盘上,用篦子或刷子捡等体表寄生虫,以湿毛笔沾起放入75%酒精中,每只鼠检获的类放入同一试管内,做好唯一性标识,在解剖镜下进行分类计数。

鼠疫实验室检测

反相间接血细胞凝集实验

反相间接血细胞凝集实验(RIHA)是用已知的鼠疫F1抗体,检查标本中的F1抗原。主要用于特殊和腐败标本的检查。标本可以是动物标本、昆虫标本、动物巢穴、排泄物、猛禽吐物及土壤标本。诊断试剂是鼠疫抗体致敏血细胞、醛化血细胞、鼠疫免疫血清和稀释液。初筛实验有两种实验方法,即试管法和微量法。初筛中出现阳性标本,将被检液与等量2.5%正常醛化血细胞混匀后室温作用1530分钟,离心后取上清供试验用。结果判定是间接血凝试验。当血凝抑制列发生(++)凝集的孔比血凝试验列少2孔以上时,可判定为血凝抑制试验阳性,证明血细胞凝集为特异性凝集。

酶联免疫吸附实验

酶联免疫吸附实验(ELISA)是利用抗原抗体反应特异性和标记酶的敏感性建立的一种诊断方法。其基本原理是用酶标记抗体,标记后的酶和抗体的活性均保持,抗体与抗原免疫学反应决定其特异性。由于用酶作为接触剂,一个酶结合抗体可使许多个底物发生反应,这种放大作用决定了其敏感性,并由底物的变化显示出实验结果。因此,可根据颜色的变化通过目测或酶标仪测定,得出结果后快速判断,并可进行半定量测定。

胶体金实验

胶体金法是由氯金酸在还原剂(如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等)作用下,聚合成一定大小的金颗粒,并因静电作用呈稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液。

先将鼠疫胶体金检测试剂放置平稳,将待检测标本200微升滴入加样孔,从滴加样品开始计时,15分钟后观察结果。当出现两条色带,即质控线和检测线皆显色为阳性结果;仅质控线显色为阴性结果;无条带出现或仅有检测线出现,说明试剂失效,应重新进行检测。

(作者单位:乌鲁木齐海关所属阿勒泰海关、乌鲁木齐地窝堡机场海关)

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